Desenvolvimento de um sistema CRISPR/Cas9 no fungo filamentoso Penicillium chrysogenum para a expressão dos fatores de transcrição XlnR e AraR e superprodução de (hemi-)celulase.
A crescente demanda pela produção de combustíveis renováveis (biocombustíveis) em substituição ao uso de combustíveis fósseis se reflete no cenário político global, e o Brasil tem papel de liderança na participação das renováveis em sua matriz energética. A hemicelulose, a segunda fração mais abundante da biomassa vegetal depois da celulose, que até recentemente era tratada apenas como resíduo, tem sido vista como uma fonte potencial para a produção de biocombustíveis e outros materiais de valor agregado. É um complexo polissacarídico heterogêneo, composto principalmente por xilose e arabinose cuja degradação requer a produção de muitas enzimas diferentes, classificadas como (hemi)-celulases, que são induzidas por biopolímeros ou seus derivados e reguladas principalmente no nível transcricional através de fatores de transcrição ( TF). Dentro destes TFs é possível destacar dois, produzidos principalmente por fungos filamentosos. XlnR, principal regulador deste complexo enzimático, e AraR, fator homólogo secundário e importante regulador em ação conjunta com XlnR. Os fungos filamentosos, organismos que produzem naturalmente enzimas que degradam esses polissacarídeos, possuem sistemas de produção e secreção de proteínas muito eficazes e biotecnologicamente atrativos. Neste contexto, o presente trabalho tem como objetivo desenvolver um sistema de edição gênica via CRISPR/Cas9 no fungo filamentoso Penicillium chrysogenum para superexpressar os TFs XlnR e AraR e avaliar a influência dessa superexpressão na produção de (hemi-)celulases.